Durch die DAkkS nach DIN EN ISO 15189:2013 akkreditiertes Labor. Die Akkreditierung gilt nur für den in der Urkundenanlage D-ML-19493-02-00 aufgeführten Akkreditierungsumfang.
Durch die DAkkS nach DIN EN ISO 15189:2013 akkreditiertes Labor. Die Akkreditierung gilt nur für den in der Urkundenanlage D-ML-19492-02-00 aufgeführten Akkreditierungsumfang.
Durch die DAkkS nach DIN EN ISO/IEC 17025 akkreditiertes Prüflabor. Die Akkreditierung gilt nur für den in der Urkundenanlage D-PL-19492-02-00 aufgeführten Akkreditierungsumfang.
Stand:
26.03.2024
Das humane Metapneumovirus ist sehr nahe verwandt mit dem RSV. Es gibt 2 Serotypen hMPV-A und hMPV-B. Wie bei einer RSV-Infektion kommt es nach einer Inkubationszeit von 3-6 Tagen zu Symptomen einer Erkältungskrankheit mit Rhinitis und Pharyngitis. Weiterhin tritt bei einem Drittel der Kinder eine Mittelohrentzündung auf. Schließlich kann es zur Entwicklung einer tiefen Atemwegserkrankung mit Bronchiolitis, Pneumonien oder Pseudokrupp kommen. Risiko für einen schweren Verlauf sind Frühgeburtlichkeit, angeborene Herzfehler, Asthma bronchiale und Immunsuppression.
Polymerase-Kettenreaktion:
Die Amplifikation und Detektion basiert auf dem TaqMan-Format.
Extrahierte RNA wird in einem Reaktionsansatz zunächst revers in die entsprechende cDNA transkribiert und diese wird anschließend mittels PCR amplifiziert. Während des Annealings hybridisieren sowohl die beiden spezifischen PCR-Primer als auch zwei für dieses Detektionsverfahren erforderliche, spezifische fluorogene Sonde am nachzuweisenden Amplifikat. Im gleichzeitig ablaufenden Extensionsschritt (Zwei-Schritt-PCR) wird diese Sonde von der 5`-3`Exonuklease-Aktivität der Taq-Polymerase gespalten, wodurch daFluoreszenzsignal ansteigt. Übersteigt das Messsignal einen von der Software des Gerätes berechneten cut-off Wert, so gilt die Probe als "positiv" und der entsprechende PCR-Zyklus, in dem die Fluoreszenz diesen "threshold" übersteigt, wird als "threshold cycle" CTdefiniert.
Die PCR wir im N-Gen des Virus durchgeführt.
Gerät: 7500 Real Time PCR System (ABI)
Das Untersuchungmateriel sollte taggleich zum Labor transportiert werden. Eine sofortige Vorbereitung des Materials ist erforderlich für eine optimale Aussagekraft des Ergebnisses.
Die Untersuchungsproben werden direkt nach Probeneingang bearbeitet oder bei -20 °C gelagert.
Beurteilung:
Nachweis des Virus beweist die Infektion.
Die Polymerase Kettenreaktion zum Nachweis von humanem Metapneumovirus ist aktuell keine Kassenleistung!
Literatur: