Durch die DAkkS nach DIN EN ISO 15189:2023 akkreditiertes Labor. Die Akkreditierung gilt nur für den in der Urkundenanlage D-ML-19493-02-00 aufgeführten Akkreditierungsumfang.
Durch die DAkkS nach DIN EN ISO 15189:2023 akkreditiertes Labor. Die Akkreditierung gilt nur für den in der Urkundenanlage D-ML-19492-02-00 aufgeführten Akkreditierungsumfang.
Durch die DAkkS nach DIN EN ISO/IEC 17025 akkreditiertes Prüflabor. Die Akkreditierung gilt nur für den in der Urkundenanlage D-PL-19492-02-00 aufgeführten Akkreditierungsumfang.
Stand:
30.09.2024
Adenoviren sind unbehüllte, sehr umweltresistente DNA-Viren. Es werden die Spezies A-G und 51 Serotypen definiert. Die Krankheitsbilder korrelieren relativ gut mit bestimmten Serotypen. Adenoviren der Spezies F (Typen 40 und 41) verursachen vorwiegend bei Säuglingen und Kleinkindern, seltener bei Jugendlichen und Erwachsenen, eine akute Gastroenteritis. Die Übertragung erfolgt fäkal-oral durch Schmierinfektion. Die Diarrhö kann bis zu 10 Tagen andauern.
Die Infektiosität der Gastroenteritis ist besonder ausgeprägt.
Die schnelle Labordiagnose erfolgt mittels Antigen-ELISA zum Nachweis der Viruspartikel im Stuhl.
Enzymimmunoassay:
An der Oberfläche der Vertiefungen der Mikrotiterplatte ist ein monoklonaler Antikörper gegen das Hexon-Antigen von Adenovirus gebunden. Eine Suspension der zu untersuchenden Stuhlprobe wird zusammen mit einem biotinylierten monoklonalen Anti-Adenovirus-Antikörpern (Konjugat 1) zur Inkubation in die Vertiefungen der Mikrotiterplatte pipettiert. Nach einem Waschschritt wird Poly-Streptavidin-Peroxidase-Konjugat (Konjugat 2) dazu gegeben und erneut inkubiert. Bei Anwesenheit von Adenoviren in der Stuhlprobe bildet sich ein Sandwich-Komlpex aus immobilisierten Antikörpern, den Adenovirus-Antigenen und den mit dem Biotin-Streptavidin-Peroxidase-Komplex konjugierten Antikörpern. Nicht gebundenes Streptavidin-Peroxidase-Konjugat wird durch einen Waschschritt entfernt. Nach Zugabe von Substrat wandelt gebundenes Enzym bei positiven Proben die farblose Lösung in der Mikrotiterplatte in eine blaue Lösung um. Durch Zugabe von Stopp-Reagenz erfolgt ein Farbumschlag von blau nach gelb. Die Extinktion ist proportional zur Konzentration des in der Probe vorhandenen Adenovirus-Antigens.
Reagenzien: Adenovirus-Test (RIDASCREEN)
Gerät: DS2
Stuhlproben, so bald als möglich nach dem Erkrankungsbeginn sammeln und schnellst möglich zum Labor transportieren.
Kann die Bestimmungen nicht sofort erfolgen, kann das verdünnte Probenmaterial bei 2 - 8 °C aufbewahrt werden. Eine Langzeit-Lagerung unverdünnter Proben ist durch Aufbewahrung bei -20 °C möglich.
Der Nachweis von Adenoviren-Antigen in Stuhlproben mittels ELISA bei einer Gastroenteritis wird für die die schnelle Diagnostik eingesetzt, besitzt jedoch eine deutlich geringere Spezifität und Sensitivität als die PCR.
Weiterhin ist der Antigennachweis in Stuhlproben von Immunsuppimierten möglicherweise ungeeignet, da er nicht alle Typen erfaßt die in diesem Patientenkollektiv vorkommen können.
Ein positiver Adenovirus-Antigenbefund wird mittels PCR-Untersuchung bestätigt.
Literatur: