ANCA (IFT, Screening)

Indikation

ANCA-assoziierte Vaskulitiden sind Gefäßentzündungen, die durch eine Autoimmunität und anti-neutrophile cytoplasmatische Antikörper (ANCA) gekennzeichnet sind. Auch wenn sich die ANCA-assoziierten Vaskulitiden über die ANCAs definieren, so ist deren Rolle in der Entstehung dieser Gefäßentzündungen nicht endgültig geklärt. Die ANCA-assoziierten Vaskulitiden sind Systemerkrankungen. Drei Erkrankungen werden zu den ANCA-assoziierten Vaskulitiden gerechnet. Das Vollbild der drei Erkrankungen beinhaltet häufig den Befall des oberen Respirationstraktes, der Lunge sowie der Niere.

Zu den drei Erkrankungen gehören:

• die Granulomatose mit Polyangiitis ( GMP, Wegenersche Granulomatose)
• die mikroskopische Polyangiitis (MPA)
• die Eosiniophile Granulomatose mit Polyangiitis (EGPA, Churg-Strauss-Syndrom)

Methode

Als Screeningmethode wird der indirekte Immunfluoreszenz-Test (IFT) auf Äthanol- und Formaldehyd-fixierten Granulozyten zum Nachweis von Anti-neutrophilen-cytoplasmatischen Antikörpern durchgeführt. Ergänzt wird die Diagnostik durch Immunoassays zum Nachweis von Autoantikörpern gegen Proteinase 3 (PR3)  und Myeloperoxidase (MPO) 

Indirekte Immunfluoreszenz-Test (IFT)

Im ersten Schritt werden die auf dem Objektträger befindlichen Substrat-Kombinationen (Äthanol-fixierte Neutrophile; Formaldehyd-fixierte Neutrophile; HEp-2-Zellen) mit Patientenserum inkubiert. Falls im Serum Antikörper gegen humane Granulozyten vorhanden sind, werden diese gebunden. Nicht gebundene Antikörper werden durch einen Waschschritt entfernt. Nach Auftragen des entsprechenden FITC-markierten Antihumanimmunglobulins (IgG) und erneuter Inkubation im zweiten Schritt wird nochmals gewaschen, um überschüssiges Konjugat zu entfernen. Der Komplex Antigen/humane Antikörper/Konjugat ist dann unter einem Fluoreszenzmikroskop bei 400facher Vergrößerung sichtbar.

Reagenzien: EUROIMMUN Granulocyten-Mosaike

Material

• Serum
• Plasma (EDTA, Heparin, Citrat)

Präanalytik

Proben sind bei  2 - 8 °C bis zu 14 Tagen stabil
Eine längere Lagerung erfolgt -20 °C eingefroren

Hinweise

Beurteilung: 

Sonstiges

Literatur:

• Labor u. Diagnose
  (L. Thomas, Hrsg.) 
  H-Books Verlagsgesellschaft mbH, Frankfurt/Main 2012 8. Auflage