Cytochemische Färbungen (POX-Färbung, Esterase-Färbung)

Indikation

Für die Einteilung von akuten Leukämien werden morphologische, cytochemische, cytogenetische sowie immunphänotypische Eigenschaften der Zellen beurteilt.
Die FAB-Einteilung der akuten myeloischen Leukämie basiert auf den Reifungsgrad, Zelllinienzugehörigkeit und Zahl der Blasten sowie Beurteilung der Cytochemie. Auch wenn die  Cytochemie nach WHO Klassifikation nicht mehr verwendet werden sollte, hat sie aus klinischer Sicht weiterhin eine praktische Relevanz.

Methode

Esterase-Färbung:

Die α-Naphthylacetatesterase katalysiert die hydrolytische Spaltung von α-Naphthylacetat zu α-Naphthol und Essigsäure. a-Naphthol wird mit einem Diazoniumsalz (Pararosanilin) zu einem wasserunlöslichen rotbraunen Azofarbstoff gekuppelt. Das pH-Optimum dieser Reaktion liegt im neutralen Bereich (pH 7,0-7,1). Monozytäre Leukämiezellen lassen sich jedoch häufig besser im sauren pH-Bereich (pH 6,1-6,3) zytochemisch detektieren.

Myelo-Peroxidase :

Peroxidase katalysiert in Anwesenheit von H₂O₂ die Polymerisation von Diaminobenzidin (Leukoform) in ein rotbraunes Farbprodukt. Die Zellkerne werden mit Mayer's Hämalaun angefärbt.

Material

Frische oder maximal 3 Tage alte Blutausstriche und Knochenmarksausstriche (EDTA oder Citrat antikoaguliert).

Hinweise

Beurteilung:

• keine cytochemische Reaktion zu detektieren: undifferenzierte Leukämien, z.B. Stammzellleukämie (M0)
• Myeloperoxidase positive Zellen: z.B. Myeloblasten-, Promyelocytenleukämie (M1-M3)
• Esterase positive Zellen: z.B. Monocytenleukämie (M5)
• Myeloperoxidase und Esterase positive Zellen: z.B. myelomonocytäre Leukämie (M4)

Sonstiges

Literaturangaben:

• Labor u. Diagnose
  (L. Thomas, Hrsg.) 
  TH-Books Verlagsgesellschaft mbH, Frankfurt/Main 2012 8. Auflage