HC2 HPV DNA Test

Indikation

Der HC2 HPV-DNA Test ist ein signalverstärkter Hybridisierungsmikrotiterplatten-Assay zum qualitativen Chemilumineszenz-Nachweis der DNA von 18 Typen des humanen Papillomavirus (HPV) in Zervixproben. Der Digene HPV-DNA-Test kann zwischen zwei HPV-DNA-Gruppen differenzieren:

• den Low-Risk HPV Typen 6/11/42/43 und 44
• den High/Intermediate-Risk HPV Typen 16/18/31/33/35/39/45/51/52/56/58/59 und 68

Methode

Proben, die die HPV-Ziel DNA enthalten, werden an einen speziellen HPV-RNA-Cocktail hybridisiert. Die daraus resultierenden RNA-DNA-Hybride werden an der Oberfläche eines Mikrotiterwells aufgefangen, die mit Antikörpern für RNA-DNA-Hybride beschichtete ist. Immobilisierte Hybride reagieren anschließend mit für die RNA-DNA-Hybride spezifischen Antikörpern, die mit alkalischer Phosphatase konjugiert sind und werden mit einem chemilumineszenten Substrat erfasst.
An jedem Antikörper sind mehrere Enzymmoleküle konjugiert, desweiteren binden an jedem aufgefangenen Hybrid mehrere konjugierte Antikörper, was zu einer starken Signalamplifikation führt. Spaltung de Substrates führt zu einer Luminiszenz, die mit dem Luminimeter als relative Lumineszenzeinheit (RLU) gemessen wird.

Material

Zervixproben:

• entnommen mit dem Zervix-Probenentnahmesystem von Digene Cervical Sampler
• entnommen mit Hilfe eines Entnahmebürstchens und in Cytyc PreservCyt-Lösung gegeben wurden
• Biopsien, die im Probentransportmedium, Digene Specimen Transport Medium (STM) transportiert wurden

Benötigtes Probenvolumen: 500 µl
Lagerung: Die Untersuchungsproben werden direkt nach Probeneingang bei -20°C gelagert, entsprechend der QM_VA_016

Hinweise

Kreuzreaktivität
Die DNA des HPV-Typs 13 zeigte eine Kreuzreaktivität mit der Low-Risk Sonde und das Plasmid pB322 zeigte eine Kreuzreaktivität sowohl mit der Low-Risk als auch mit der High-Risk Sonde.
Falsch negative Ergebnisse
Falls hohe Konzentrationen einer Pilzsalbe oder eines Verhütungsgels in klinischen Proben präsent sind, kann es zu falsch negativen Ergebnissen kommen, wenn sich die HPV-Konzentrationen nahe dem Grenzwert befinden.
Sensitivität
Sensitivität: 93%
Spezifität Spezifität: 61,1%