Vitamin B12 (Cobalamin)

Indikation

Vitamin B12 ist essentiell für den Ein-Kohlenstoff-Metabolismus sowie für die Zellteilung. Die Synthese von Viramin B12 findet nur in Mikroorganismen statt. Der Mensch ist auf zusätzliche Aufnahme des Vitmain B12 mit der Nahrung (Fleisch, Fisch, Milch, Käse, Eier) angewiesen. 

Die Indikation zur Bestimmung des Vitamin B12 ist bei folgenden Risikopopulationen gegeben:

• Vegetarische, vegane oder makrobiotische Diät sowie Neugeborene und gestillte Kleinkinder von vegetarischen Müttern
• Alte Menschen
• Neurodegenerative und -psychiatrische Erkrankungen
• Chronisch-atropische Corpus-Gastritis
• Erkrankungen des terminalen Ileum
• Makrozytäre Anämie
• Chronischer Alkoholismus
• Medikamente
• AIDS-assoziierte Myelopathie 

Methode

Electro-Chemi-Lumineszenz-Immunoassay (ECLIA)

Kompetitionsprinzip:
Durch Inkubation der Probe mit den VitaminB12-Vorbehandlungsreagenzien wird gebundenes Vitamin B12 freigesetzt. Nach Inkubation der vorbehandelten Probe mit Ruthenium-markierten Intrinsic Factor wird ein Vitamin B12-Bindungsprotein-Komplex gebildet und nach Zugabe von Streptavidin beschichteten Mikropartikeln und biotinyliertem Vitamin B12 werden unter Bildung eines Ruthenium-markierten Intrinsic Factor-Vitamin B12-Biotin-Komplexes die noch freien Bindungsstellen des Ruthenium-markierten Intrinsic Factors besetzt. Der Gesamtkomplex wird über die Biotin-Streptavidin-Wechselwirkung an die Festphase gebunden, in die Messzelle überführt und die Mikropartikel durch magnetische Wirkung auf die Oberfläche der Elektrode fixiert. Nach einem Waschschritt werden ungebundene Substanzen entfernt und nach Anlegen einer Spannung wird die Chemilumineszenzemmission induziert und mit dem Photomultiplier gemessen. Die Ergebnisse werden anhand einer Kalibrationskurve ermittelt.

Material

• Serum
• Plasma (Heparin, EDTA)

Präanalytik

Das Untersuchungsmaterial sollte so schnell wie möglich zum Labor transportiert werden.

Probenstabilität

• 2 Stunden bei Raumtemperatur
• 2 Tage bei 2 - 8 °C
• 56 Tage bei -20 °C

Referenzbereich

Erwachsene
211 - 911 pg/ml

Hinweise

Die Sensitivität und Spezifität der Gesamt-Vitamin B12-Konzentration ist limitiert insbesondere im unteren Referenzbereich.
Ein Verdacht auf einen Vitamin B12-Mangel kann durch die Bestimmung von Holotranscobalamin (HoloTC) sowie Methylmalonsäure (MMA) bestätigt werden.
Erniedrigte HoloTC-Spiegel zeigt eine negative Vitamin B12-Bilanz an. Bei einem metabolisch manifesten Vitamin B12-Mangel ist der HoloTC-Spiegel erniedrigt und die MMA-Konzentration erhöht.

Sonstiges

Literaturangabe

Labor u. Diagnose
(L. Thomas, Hrsg.) 
TH-Books Verlagsgesellschaft mbH, Frankfurt/Main 2012 8. Auflage